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“九一八”
事变前夕，日本军国主义势力屡在中国东北挑起事端。
蔡元培公开发表了对日问题的看法，一方面，他建议向东北地区移民，充实东北三省；针对日本人在中国东北地区搞的“满铁调查”
，蔡元培说，“日人以一南满铁道会社之力，作种种调查事业[100]，巨细不遗，随时刊布，设资源馆，以陈列当地物特产，设中央试验馆，搜罗专门学者，研究种种问题，以指导企业者而代为计划。
在上海同文书院的学生，每人都有在我国内地实地调查的报告。
我们现在要知道的事情，反而要借助于日本的书籍，这还了得！
现在我们各地均有党部，留学界也有，谁敢说在党部服务的同志，竟不及同文书院的学生吗？要是能把当地的情形的调查与研究，列入工作，几年后，必可大有贡献”
。
[101]
“九一八”
事变爆发后，举国震惊。
蔡元培马上放弃了在国民党内成立第三势力，制约蒋介石等的活动，调和宁粤矛盾，以图一致对外。
这年12月15日，蔡元培在接见南京国民党中央党部请愿抗日的北平学生时，混乱中被激愤难遏的学生打伤。
蔡元培一方面觉得学生的行动粗暴，“必有反动分子主动其间”
，但他对爱国学生并没有过于责备，反而说，“值兹国难，吾人精神上受日本帝国主义者侵略，伤痛已极！
尚复何所怨尤？……如果全体学生出于爱国之真诚，自为我民族精神之表现，倘从此能编练成为坚苦之义勇军，以备万一，固亦属壮举……至个人对学生救国之轨内行动，纯洁热诚，仍愿政府与社会加以爱护，绝不因今日之扰乱而更变平素之主张也”
。
[102]
从此，蔡元培在国民党内力主抗战，并力促蒋介石的国民党政权改变消极抗战政策。
1932年1月28日夜11点，日本海军陆战队突然进攻上海闸北地区，遭到中国驻军的奋勇反击，爆发了惨烈的“淞沪保卫战”
。
日军对上海市区进行了不分区别的轰炸，多家极具影响的文化机关被毁，其中就有著名的商务印书馆。
后来商务印书馆出的一本《茶花女遗事》，注有“国难后第一版”
字样，版权页印有一则简短明了、痛入骨髓的启示文字：“民国二十一年一月十九日，敝公司突遭国难，总务处、印刷所、编译所、书栈房均被炸毁，附设之涵芬楼、东方图书馆、尚公小学亦遭殃及，尽付焚如，三十五载之经营，于一旦。”
蔡元培代表中研院，联合国内各大学校长致电国联，愤怒抗议日军野蛮轰炸文化单位，同时，致电国际名人如爱因斯坦、杜威、巴特勒等著名学人，控诉日军罪行，争取国际舆论的同情。
战役结束后，阵亡将士公墓上树起一方石碑，刻有蔡元培悲愤而书的铭文：
淞沪一役，顽寇逞凶。
洸洸武士，来摧其锋。
忠贯日月，气挟云龙。
攻坚陷阵，决脰断胸。
谁能无死，死国从容。
谁不慕义，义战肃雍。
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